DNA pol β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422336

개요

Polb는 손상된 염기가 제거된 뒤 생기는 짧은 DNA 틈을 메우고 5′-데옥시리보스 인산(5′-dRP) 중간체를 처리하는 염기 절제 수선(BER) 경로의 핵심 효소인 DNA 중합효소 β를 암호화합니다. DNA 중합효소 β는 XRCC1, DNA 리가아제 III 및 기타 BER 인자들과 협력하여 유전체 안정성을 유지하고 산화 및 알킬화로 유발되는 손상의 축적을 제한합니다. 중합효소 β를 포함한 BER 구성요소의 기능 이상 또는 발현 조절 이상은 돌연변이 부담 증가, DNA 손상 신호전달 장애, 그리고 세포 스트레스 반응의 변화와 연관되어 있습니다. 이러한 기능 때문에 Polb는 DNA 수선 능력, 유전독성 감수성, 그리고 수선 결함이 질병 관련 유전체 불안정성과 연결되는 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

DNA pol β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Polb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Polb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Polb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DNA pol β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DNA pol β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Polb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DNA pol β 기능에 중요한 Polb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Polb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DNA pol β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DNA pol β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Polb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DNA pol β HDR 플라스미드 (m) 및 DNA pol β HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Polb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Polb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.