Dlx-3 Double Nickase Plasmid (h): sc-405063-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Dlx-3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Dlx-3 Double-Nickase-Plasmid (h) und Dlx-3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DLX3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Dlx-3: sc-514094
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Dlx-3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405063-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dlx-3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405063-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLX3 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor Dlx-3, einen sequenzspezifischen, DNA-bindenden Regulator, der Genprogramme koordiniert, die für die epitheliale Differenzierung, die Entwicklung von Haarfollikeln und Zähnen sowie die Funktion von Trophoblasten in der Plazenta erforderlich sind. Dlx-3 beeinflusst Entscheidungen über das Zellschicksal, indem es in entwicklungsbiologische Transkriptionsnetzwerke eingebunden ist und Signalwege moduliert, die die Reifung von Keratinozyten, den Umbau der extrazellulären Matrix und die Morphogenese steuern. Eine veränderte DLX3-Aktivität wurde mit Phänotypen der ektodermalen Dysplasie in Verbindung gebracht, darunter das Tricho-dento-osseöse Syndrom, und seine Fehlregulation wird genutzt, um Mechanismen zu untersuchen, die der kraniofazialen Musterbildung und der Ausbildung von Barrierefunktionen zugrunde liegen. In humanen Zellmodellen bietet eine Störung von DLX3 einen gut handhabbaren Ansatz, um linienspezifische transkriptionelle Schaltkreise und differenzierungsabhängige Genexpression zu analysieren.
Dlx-3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DLX3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DLX3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DLX3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DLX3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.