Dlx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420012

概要

Dlx1 は、DNA に結合して遺伝子発現を制御するホメオボックス型転写因子 Dlx-1 をコードしており、胚のパターニングや神経発生に必要な遺伝子発現プログラムを統括します。マウスでは Dlx-1 は前脳の発生に顕著に関与し、GABA 作動性介在ニューロン系譜の規定、移動、分化などに関わるほか、頭蓋顔面および鰓弓（咽頭弓）の形態形成にも寄与します。下流の発生ネットワークを転写制御することを通じて、Dlx-1 は細胞運命の決定、組織のパターン形成、神経回路の成熟に影響を与えます。DLX1 に関連する遺伝子プログラムの異常な制御は、文献上、特定の細胞状況において神経発生の軌道変化や腫瘍性表現型と関連づけられており、分化機構や疾患関連の転写状態を解析する研究において重要です。

Dlx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるDlx1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Dlx1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Dlx1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Dlx-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Dlx-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Dlx1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Dlx-1の機能に不可欠なDlx1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Dlx1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Dlx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびDlx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Dlx1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Dlx-1 HDRプラスミド（m）および Dlx-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDlx1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDlx1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。