Dkk-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420004-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dkk-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dkk-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Dkk-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dkk1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dkk-1 Anticorpo (B-7): sc-374574
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dkk-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420004-NIC | 20 µg | $410.00 |
Dkk1 codifica a Dickkopf-1 (Dkk-1), um antagonista secretado da sinalização canônica Wnt/β-catenina, que se liga aos correceptores LRP5/6 e modula a ativação da via dependente de Frizzled. Ao ajustar programas transcricionais conduzidos por Wnt, a Dkk-1 influencia decisões de destino celular, proliferação, diferenciação e a padronização de tecidos durante o desenvolvimento e a homeostase no adulto. Em modelos murinos, alterações na atividade de Dkk1 têm sido associadas à osteogênese e à remodelação óssea desreguladas, à regeneração tecidual prejudicada e a mudanças em redes de sinalização associadas a tumores, por efeitos sobre o equilíbrio da via Wnt. Seu modo de ação extracelular também torna a Dkk-1 um ponto útil para estudar a dinâmica ligante–receptor e o cross-talk entre vias em sistemas focados em células-tronco e no microambiente.
Dkk-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dkk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dkk1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dkk1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dkk1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.