Dia 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420000-KO-2

개요

Diaph1(mDia1)은 RhoA를 포함한 Rho 계열 GTPase 하위에서 선형 F-액틴 조립을 조율하는 액틴 핵형성 및 신장 인자인 포르민(formin) Dia 1을 암호화한다. Dia 1은 신호 자극을 액틴 역학 및 미세소관 안정화와 연결함으로써 세포 극성화, 부착, 세포질분열, 유도성 이동과 같은 세포골격 재구성 과정을 뒷받침한다. 이러한 기능을 통해 Diaph1은 면역세포 이동(trafficking), 혈관 및 상피 장벽의 거동, 기계신호 전달(mechanotransduction)을 조절하는 경로에서 자주 연구된다. DIAPH1 활성의 변화는 혈소판 및 혈액학적 표현형과 진행성 감각신경성 난청을 포함한 세포골격 관련 병태생리와 연관되어 왔으며, 이로 인해 마우스 시스템에서의 기전 연구가 촉진되고 있다.

Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Diaph1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Diaph1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Diaph1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dia 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dia 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Diaph1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dia 1 기능에 중요한 Diaph1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Diaph1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Diaph1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dia 1 HDR 플라스미드 (m) 및 Dia 1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Diaph1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Diaph1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.