Dia 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401929

개요

DIAPH1(Dia1)은 RhoA에 반응하는 포르민(formin)을 암호화하며, 선형 액틴 필라멘트의 핵형성(nucleation)과 신장(elongation)을 촉진해 세포 형태, 부착, 방향성 이동에 필요한 세포골격 재구성을 조정합니다. Dia1은 Rho GTPase 신호전달과 연계되고 프로필린(profilin) 및 기타 액틴 조절인자들과 협력하여 스트레스 섬유(stress fiber) 형성, 필로포디아(filopodia) 생성, 세포질분열(cytokinesis)을 지원합니다. 또한 액틴-미세소관 간 상호작용과 막 수송에 미치는 영향을 통해 방추체 위치 조절(spindle positioning)과 소포(vesicle) 동역학과 같은 과정에도 기여합니다. DIAPH1 활성의 이상 조절은 변화된 기계신호전달(mechanotransduction)과 연관되어 있으며, 유전성 난청 및 혈소판/세포골격 관련 표현형 등 질환과의 관련성이 보고되어 사람 세포 시스템에서 기능 연구를 위한 유용한 표적으로 여겨집니다.

Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DIAPH1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DIAPH1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DIAPH1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dia 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dia 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DIAPH1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dia 1 기능에 중요한 DIAPH1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DIAPH1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dia 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DIAPH1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dia 1 HDR 플라스미드 (h) 및 Dia 1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DIAPH1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DIAPH1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.