DEC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402058-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DEC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DEC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DEC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BHLHE40. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DEC1 Anticorpo (S-8): sc-101023
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DEC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402058-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402058-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BHLHE40 codifica o fator de transcrição do tipo hélice–alça–hélice básico DEC1 (também conhecido como BHLHE40/STRA13), um regulador dependente do contexto da expressão gênica que integra sinais de hipóxia e do ritmo circadiano. O DEC1 participa de programas transcricionais a jusante do sensoriamento de oxigênio e do estresse celular, influenciando a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a adaptação metabólica por meio de interações com componentes centrais do relógio biológico e redes responsivas à hipóxia. Ao modular alvos envolvidos em proliferação, apoptose e sinalização inflamatória, o BHLHE40 tem sido associado a alterações na biologia tumoral, na função de células imunes e nas respostas ao estresse do microambiente. Essas propriedades tornam o DEC1 um ponto útil para estudar o controle transcricional na interação entre hipóxia e ritmo circadiano e em vias de adaptação ao estresse em células humanas.
DEC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BHLHE40 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BHLHE40. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BHLHE40. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BHLHE40 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.