DDX46 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407298

개요

DDX46는 ATP 의존성 RNA 헬리케이스를 암호화하며, 스플라이소좀 내 U5 snRNP의 핵심 구성요소로서 pre-mRNA 스플라이싱과 스플라이스 부위의 정확성을 뒷받침합니다. 스플라이소좀의 조립 및 촉매적 활성화 과정에서 RNA–단백질 복합체를 재구성함으로써, DDX46는 전사체 성숙, 대체 스플라이싱 프로그램, 그리고 그에 따른 단백질체 구성에 영향을 미칩니다. 스플라이소좀 헬리케이스 활성의 교란은 세포주기 진행, DNA 손상 반응, 스트레스 적응성 전사 출력물을 조절하는 RNA 처리 네트워크를 변화시킬 수 있습니다. U5 관련 인자를 포함한 비정상적인 스플라이싱 기구는 종양성 전사체 재편과 신경발달 및 신경퇴행성 질환 기전에 폭넓게 연관되어 있어, DDX46는 RNA 생물학 연구에서 유용한 핵심 노드로 간주됩니다.

DDX46 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DDX46 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DDX46 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DDX46의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DDX46 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DDX46 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DDX46 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DDX46 기능에 중요한 DDX46 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DDX46 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DDX46 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DDX46 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DDX46 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DDX46 HDR 플라스미드 (h) 및 DDX46 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DDX46 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DDX46 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.