DCC 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401035-NIC

DCC(deleted in colorectal carcinoma)는 면역글로불린 초가족에 속하는 netrin-1 수용체를 암호화하며, Rho 계열 GTPase 신호전달과 초점접착(focal adhesion) 동역학을 포함한 경로를 통해 축삭 유도, 신경세포 이동, 세포골격 재구성을 조절한다. 리간드가 없을 때 DCC는 의존성 수용체(dependence receptor)로 작용하여 세포사멸과 세포 생존에 영향을 줄 수 있으며, 이는 세포외 신호 단서의 감지가 세포내 신호전달의 결정으로 이어지도록 연결한다. 신경발달을 넘어 DCC는 다양한 조직에서 세포 접착과 방향성 이동에 기여하며, DCC 발현의 변화 또는 유전체 수준의 교란은 종양 진행, 침윤성 표현형, 신경발달 이상과 연관되어 왔다. 이러한 특성 때문에 DCC는 유도 신호 단서(guidance cue) 신호전달, 형태형성, 그리고 질환과 관련된 세포 운동성 및 생존 프로그램의 변화를 기전적으로 연구하는 데 유용한 표적이다.

DCC 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 DCC 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 DCC 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 DCC의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, DCC 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.