DARPP-32 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422380

개요

Ppp1r1b는 선조체의 중간가시뉴런에서 도파민성 및 글루탐산성 신호를 통합하는 핵심 인자인 DARPP-32(도파민 및 cAMP 조절 인산화단백질, 32 kDa)를 암호화한다. DARPP-32는 인산화 상태에 따라 기능이 전환되는 방식으로 단백질 인산가수분해효소-1(PP1)의 활성을 조절하며, cAMP/PKA 신호를 시냅스 가소성, 이온 채널 기능, 신경전달물질 수용체 신호의 하위 조절과 연결한다. 이 노드는 보상 학습, 운동 조절, 신경조절물질에 대한 전사 반응을 관장하는 경로들과 교차하므로, Ppp1r1b는 기저핵 회로 연구에서 흔히 사용되는 공통적인 readout이다. DARPP-32 신호의 변화는 도파민 신호 조절 이상, 부적응적 가소성, 생쥐 모델에서의 스트레스 관련 행동 표현형 등을 포함한 신경정신질환 및 신경퇴행성 질환 기전과 연관되어 왔다.

DARPP-32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ppp1r1b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ppp1r1b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ppp1r1b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DARPP-32 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DARPP-32 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ppp1r1b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DARPP-32 기능에 중요한 Ppp1r1b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ppp1r1b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DARPP-32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DARPP-32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ppp1r1b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DARPP-32 HDR 플라스미드 (m) 및 DARPP-32 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ppp1r1b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ppp1r1b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.