Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DAP12 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400916-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- DAP12 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- DAP12 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 DAP12 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 TYROBP을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 DAP12 Antibody (G-5): sc-133174
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
DAP12 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DAP12 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
인간 TYROBP 유전자는 DAP12(또는 TYROBP로도 알려짐)를 암호화하며, DAP12는 ITAM 모티프를 통해 면역수용체 신호전달을 세포내 활성화로 연결하는 막관통 어댑터 단백질이다. DAP12는 TREM2, SIRPβ1, 다양한 활성화 KIR 등과 같은 수용체와 결합해 SYK 의존성 경로를 유도하며, 이는 식세포작용, 사이토카인 생성, 세포골격 재구성, 선천면역 세포 성숙을 조절한다. 또한 대식세포, 미세아교세포, 수지상세포, 파골세포를 포함한 골수계 계통 세포에서 높은 수준으로 발현되어, 세포외 자극을 염증 및 항상성 프로그램과 연결한다. TYROBP–DAP12 신호전달의 유전적 교란은 신경염증 기전 및 골-면역학(osteoimmunology)과 연관되어 왔으며, 나수–하콜라병과 같은 질환 및 보다 광범위한 미세아교세포 기능장애 맥락에서의 관련성이 제시된다.
DAP12 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 TYROBP 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 TYROBP 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 TYROBP의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, TYROBP 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.