Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406444

개요

CARS는 세포질 시스테이닐‑tRNA 합성효소(CysRS)를 암호화하며, 이는 class I 아미노아실‑tRNA 합성효소로서 세포질에서 시스테인을 해당 tRNA에 결합시켜 번역의 정확성을 보장합니다. 세포질 CysRS는 충전된 tRNA\(^\text{Cys}\)의 공급을 조절함으로써 전반적인 단백질 합성을 뒷받침하고, 아미노산 가용성을 단백질 항상성(proteostasis) 경로와 연결합니다. 여기에는 번역을 조절하는 스트레스 반응도 포함됩니다. 아미노아실‑tRNA 합성효소 활성이 교란되면 리보솜 동역학이 변하고 통합 스트레스 신호(integrated stress signaling)가 유발될 수 있으며, 그 결과 세포 성장, 대사, 그리고 시스테인 이용에 의존하는 산화환원 민감 과정에 하위 영향이 나타날 수 있습니다. tRNA 충전 및 번역 품질 관리의 이상 조절은 신경발달 및 신경근육 표현형, 증식성 질환, 그리고 세포 스트레스 적응 연구와 관련이 있습니다.

Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CARS 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CARS 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CARS의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cytoplasmic CysRS 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cytoplasmic CysRS 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CARS 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cytoplasmic CysRS 기능에 중요한 CARS 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CARS 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CARS 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cytoplasmic CysRS HDR 플라스미드 (h) 및 Cytoplasmic CysRS HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CARS 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CARS 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.