Cytokeratin 19 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400281-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cytokeratin 19O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 19 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 19 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KRT19. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cytokeratin 19 Anticorpo (A-3): sc-376126
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cytokeratin 19 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 19 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT19 codifica a citoqueratina 19, uma proteína de filamento intermediário do tipo I que contribui para a organização do citoesqueleto epitelial, a estabilidade mecânica celular e a manutenção da polaridade. A citoqueratina 19 participa de processos de montagem e remodelação de filamentos de queratina que se coordenam com a adesão celular e com complexos juncionais, influenciando a diferenciação epitelial e as respostas ao estresse. A expressão alterada de KRT19 é frequentemente utilizada como indicador molecular de linhagem epitelial e de mudanças no estado celular observadas durante displasia, mudança fenotípica associada à invasão e disseminação metastática. Na pesquisa de doenças humanas, KRT19 é comumente avaliado no contexto da heterogeneidade tumoral, da regulação de marcadores epiteliais e de programas de sinalização ligados à migração e à sobrevivência.
Cytokeratin 19 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KRT19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KRT19. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KRT19. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KRT19 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.