Cytokeratin 18 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400305

개요

KRT18은 단순 상피세포의 핵심 세포골격 네트워크를 이루는 I형 중간섬유 단백질인 사이토케라틴 18을 암호화합니다. 사이토케라틴 18은 케라틴 8과 이종중합(heteropolymerization)하여 필라멘트를 형성하며, 이 필라멘트 시스템은 세포의 구조와 기계적 탄성을 지지하고 접합 복합체, 소기관의 위치 조절, 그리고 세포주기 진행과 세포사멸을 조율하는 스트레스 반응 신호전달과도 상호작용합니다. 사이토케라틴 18의 동역학은 인산화와 단백질분해성 가공에 의해 조절되며, 이는 유사분열 및 세포 스트레스 동안의 세포골격 재구성과의 연관성을 시사합니다. KRT18의 발현 또는 필라멘트 조직화가 비정상적으로 조절되는 현상은 상피 상태를 나타내는 표지로 자주 활용되며, 상피 손상, 염증, 종양 세포 생물학 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔습니다.

Cytokeratin 18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KRT18 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KRT18 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KRT18의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cytokeratin 18 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cytokeratin 18 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KRT18 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cytokeratin 18 기능에 중요한 KRT18 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KRT18 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cytokeratin 18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Cytokeratin 18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KRT18 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cytokeratin 18 HDR 플라스미드 (h) 및 Cytokeratin 18 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KRT18 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KRT18 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.