Cytokeratin 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400193-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cytokeratin 10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KRT10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cytokeratin 10 Anticorpo (LH2): sc-53252
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cytokeratin 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400193-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT10 codifica a citoqueratina 10, uma proteína de filamento intermediário do tipo I que se associa à queratina 1 para formar a rede de queratinas suprabasais em epitélios estratificados. Esse sistema de filamentos confere resistência mecânica, dá suporte à adesão célula–célula associada a desmossomos e contribui para a diferenciação terminal e para a formação da barreira epidérmica. A expressão de KRT10 está intimamente ligada aos programas de maturação dos queratinócitos e ao diálogo cruzado com vias de diferenciação dependentes de cálcio e de resposta ao estresse que remodelam o citoesqueleto. A interrupção genética ou a expressão desregulada de KRT10 está associada a distúrbios hereditários da cornificação, incluindo a ictiose epidermolítica, e é frequentemente usada como marcador de diferenciação epitelial alterada em modelos de doenças dermatológicas.
Cytokeratin 10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KRT10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KRT10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KRT10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KRT10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.