cytochrome c CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417607

개요

CYCS는 미토콘드리아 막간 공간에 존재하는 헴(heme) 함유 전자 운반체인 사람 시토크롬 c를 암호화하며, 복합체 III(시토크롬 bc1)와 복합체 IV(시토크롬 c 산화효소) 사이에서 전자를 전달해 산화적 인산화와 세포 ATP 생산을 뒷받침합니다. 에너지 대사 기능을 넘어, 시토크롬 c는 내인성 세포사멸(apoptosis)의 핵심 매개체로서 미토콘드리아 외막 투과화가 일어나면 세포질로 방출되고, 이후 APAF1 및 카스파아제-9와 함께 아폽토솜(apoptosome)을 형성합니다. CYCS의 기능은 산화환원 항상성, 미토콘드리아 역동성, 스트레스 반응 신호전달과도 교차해 미토콘드리아 기능장애 연구 전반에서 폭넓게 중요합니다. 시토크롬 c 의존적 호흡 변화와 세포사멸 수행 능력의 변동은 신경퇴행, 심대사성 손상, 암세포 생존 표현형 등의 맥락에서 자주 조사됩니다.

cytochrome c CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CYCS 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CYCS 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CYCS의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cytochrome c 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cytochrome c 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CYCS 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cytochrome c 기능에 중요한 CYCS 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CYCS 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cytochrome c CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 cytochrome c CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CYCS 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cytochrome c HDR 플라스미드 (h) 및 cytochrome c HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CYCS 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CYCS 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.