Cystinosin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429900

개요

Ctns는 리소좀 막에 존재하는 H⁺ 구동성 시스틴 수송체인 시스티노신(cystinosin)을 암호화하며, 리소좀 내강에서 세포질로 시스틴을 유출시키는 역할을 합니다. 이를 통해 리소좀 수송을 세포의 산화환원 균형 및 아미노산 항상성과 연결합니다. 시스티노신 기능이 소실되면 리소좀 기능이 교란되고 시스틴이 축적되며, 자가포식–리소좀 동역학, 산화 스트레스 반응, 대사 적응에 관여하는 경로들이 변화합니다. 마우스 시스템에서 Ctns 교란은 시스틴 저장 관련 표현형의 기저 메커니즘을 모델링하고, 리소좀 수송 결함이 세포 스트레스 신호전달을 어떻게 재편하는지 살펴보기 위해 널리 사용됩니다. 이러한 과정은 리소좀 중심의 수송 및 분해 네트워크가 신장, 안구, 면역 관련 세포 유형에서 조직 항상성에 어떤 영향을 미치는지 이해하는 데 중요합니다.

Cystinosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ctns 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ctns 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ctns의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cystinosin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cystinosin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ctns 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cystinosin 기능에 중요한 Ctns 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ctns 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cystinosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Cystinosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ctns 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cystinosin HDR 플라스미드 (m) 및 Cystinosin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ctns 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ctns 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.