CYP2J2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402955

개요

CYP2J2는 미소체(microsomal) 사이토크롬 P450 모노옥시게나아제를 암호화하며, NADPH 의존적으로 내인성 지질과 외인성 물질(xenobiotics)을 산화합니다. 특히 아라키돈산에 대한 에폭시게나아제 활성이 두드러져 에폭시에이코사트리에노산(EETs)을 생성합니다. 이러한 대사산물은 혈관 긴장도 조절, 염증 신호전달, 세포 증식, 산화 스트레스 반응 조절에 기여하며, CYP2J2 활성을 아이코사노이드 및 지질 매개체 경로와 연결합니다. CYP2J2는 심혈관계 및 간 이외 조직에서 발현되어 내피 기능과 대사 항상성 유지에 관여하는 것으로 여겨지며, 발현 또는 활성의 변화는 심대사 및 염증 관련 표현형과 연관되어 왔습니다. 암 생물학 분야에서는 CYP2J2 의존적 지질 신호전달이 종양세포의 생존, 이동, 미세환경 간 상호작용과 관련하여 연구되어 왔고, 따라서 기전 연구를 위한 유용한 표적이 됩니다.

CYP2J2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CYP2J2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CYP2J2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CYP2J2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CYP2J2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CYP2J2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CYP2J2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CYP2J2 기능에 중요한 CYP2J2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CYP2J2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CYP2J2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CYP2J2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CYP2J2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CYP2J2 HDR 플라스미드 (h) 및 CYP2J2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CYP2J2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CYP2J2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.