CYP2A6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403448

개요

CYP2A6는 다양한 외인성 물질(xenobiotics)과 일부 내인성 기질의 산화적 대사를 촉매하는 인간 시토크롬 P450 모노옥시게나아제를 암호화하며, 세포의 화학적 항상성과 산화환원 균형 유지에 기여한다. 소포체에 국재하는 헴 단백질로서 CYP2A6는 1상 약물 대사 경로에서 기능하고, NADPH–시토크롬 P450 환원효소와 협력하여 기질 산화 과정의 전자 전달을 지원한다. CYP2A6의 발현 또는 활성의 변이는 대사 플럭스를 변화시켜 화학물질 유발 독성 및 발암물질 활성화에 대한 감수성에 영향을 줄 수 있으므로, 약물유전체학적 다양성과 노출 관련 질병 기전 연구에서 중요하다. 또한 간에서의 높은 발현과 유도성 조절 특성은 전사 조절, 효소 안정성, 환경 화학물질에 대한 적응 반응을 연구하는 데에도 근거를 제공한다.

CYP2A6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CYP2A6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CYP2A6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CYP2A6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CYP2A6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CYP2A6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CYP2A6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CYP2A6 기능에 중요한 CYP2A6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CYP2A6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CYP2A6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CYP2A6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CYP2A6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CYP2A6 HDR 플라스미드 (h) 및 CYP2A6 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CYP2A6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CYP2A6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.