Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CUL-4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430261
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CUL-4A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CUL-4A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CUL-4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430261 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Cul4a** de camundongo codifica a **CUL-4A**, uma proteína arcabouço da família das culinas que monta complexos de ligase E3 de ubiquitina **CUL4–DDB1** para direcionar a ubiquitinação e a degradação proteassomal de reguladores-chave da dinâmica da cromatina e da estabilidade genômica. A CUL-4A participa do reconhecimento de danos ao DNA e da sinalização de reparo, incluindo o reparo por excisão de nucleotídeos e processos associados à replicação, e ajuda a coordenar a progressão do ciclo celular por meio da degradação proteica regulada. Ao modular a proteostase na cromatina, a CUL-4A influencia programas transcricionais e respostas de checkpoint sob estresse genotóxico. A ubiquitinação dependente de CUL4A desregulada tem sido associada a fenótipos de proliferação aberrante e instabilidade genômica, tornando **Cul4a** um alvo útil para estudos mecanísticos de vias oncogênicas em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CUL-4A (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cul4a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cul4a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cul4a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CUL-4A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cul4a para a investigação da sinalização de CUL-4A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cul4a críticos para a função CUL-4A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cul4a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CUL-4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CUL-4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cul4a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CUL-4A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CUL-4A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cul4a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cul4a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.