CUL-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-416925

개요

CUL3는 컬린-3(CUL-3)을 암호화하며, 이는 BTB 도메인 어댑터 단백질을 모집해 유비퀴틴화 및 프로테아좀 분해에서 기질 특이성을 부여하는 CUL3–RBX1 E3 유비퀴틴 리가아제 복합체의 핵심 스캐폴드입니다. CUL-3는 산화환원 항상성, 세포 주기 조절, 세포골격 역학, 스트레스 신호전달에 관여하는 표적들의 조절된 분해를 통해 유비퀴틴–프로테아좀 기능과 NRF2/KEAP1 매개 산화스트레스 반응과 같은 경로를 조정하는 데 기여합니다. CUL3 의존적 유비퀴틴화가 교란되면 염증, 대사, 유전체 무결성에 영향을 미치는 단백질 항상성과 신호 네트워크가 붕괴될 수 있습니다. 문헌에서는 CUL3 활성의 이상 및 어댑터 상호작용의 변화가 암 관련 경로와 심혈관 및 신경발달 질환 기전과 연관되는 것으로 보고되어, CUL3가 경로 규명을 위한 유용한 노드임을 뒷받침합니다.

CUL-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CUL3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CUL3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CUL3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CUL-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CUL-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CUL3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CUL-3 기능에 중요한 CUL3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CUL3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CUL-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CUL-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CUL3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CUL-3 HDR 플라스미드 (h) 및 CUL-3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CUL3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CUL3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.