CTHRC1 Plasmide Double Nickase (h2): sc-418193-NIC-2
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CTHRC1 Plasmide Double Nickase (h2) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CTHRC1 Double Nickase Plasmid (h2) e il CTHRC1 Double Nickase Plasmid (h22) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTHRC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CTHRC1 Antibody (1G12): sc-293270
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CTHRC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano CTHRC1 (collagen triple helix repeat containing 1) codifica una proteina secreta associata alla matrice extracellulare che modula il rimodellamento tissutale influenzando la deposizione di collagene e regolando la migrazione cellulare. CTHRC1 è collegato a programmi responsivi al TGF-β e interagisce con la segnalazione Wnt non canonica/polarità planare cellulare, contribuendo a plasmare la dinamica del citoscheletro, l’adesione e la motilità direzionale in contesti stromali e vascolari. Un’espressione deregolata di CTHRC1 è spesso associata a rimodellamento fibrotico e a cambiamenti del microambiente tumorale, dove correla con un comportamento invasivo e con un’organizzazione alterata della matrice. L’editing genetico di CTHRC1 supporta studi meccanicistici sulla segnalazione della matrice extracellulare, sulla plasticità epitelio-mesenchimale e sul crosstalk cellula-matrice in modelli di fibrosi, infiammazione e biologia del cancro.
CTHRC1 Il plasmide Double Nickase (h2) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTHRC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTHRC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTHRC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTHRC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.