CstF-64T CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406358

개요

CSTF2T는 pre-mRNA의 3′ 말단 처리와 폴리아데닐화(polyadenylation)를 유도하는 절단 자극 인자(cleavage stimulation factor, CstF) 복합체의 RNA 결합 소단위인 CstF-64T를 암호화합니다. CstF-64T는 절단 부위 선택과 대체 폴리아데닐화(alternative polyadenylation)에 영향을 줌으로써 전사체 아이소폼 다양성, mRNA 안정성, 번역 조절에 기여하며, 그 결과 세포 상태와 분화 프로그램에 하위 영향을 미칩니다. 이러한 활성은 특히 생식계열(germline) 맥락 및 3′ UTR 길이 변화가 전사 후 조절을 재구성하는 모델에서 중요합니다. CSTF2T 관련 경로를 포함한 절단 및 폴리아데닐화 기계의 조절 이상은 암 및 발생생물학에서 연구되는 증식성 및 스트레스 적응 표현형에서 관찰되는 광범위한 유전자 발현 변화와 연관되어 있습니다.

CstF-64T CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CSTF2T 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CSTF2T 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CSTF2T의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CstF-64T 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CstF-64T 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CSTF2T 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CstF-64T 기능에 중요한 CSTF2T 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CSTF2T 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CstF-64T CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CstF-64T CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CSTF2T 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CstF-64T HDR 플라스미드 (h) 및 CstF-64T HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CSTF2T 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CSTF2T 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.