CSN1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-404934-NIC

인간 GPS1 유전자는 COP9 시그날로좀의 핵심 구성 요소인 COP9 시그날로좀 서브유닛 1(CSN1)을 암호화한다. COP9 시그날로좀은 컬린의 네딜화(neddylation)를 조절하고 유비퀴틴 의존적 단백질 분해(턴오버)를 조율함으로써 cullin-RING 유비퀴틴 리가아제를 조절한다. 이러한 기능을 통해 CSN1은 세포주기 진행, DNA 손상 반응, 스트레스 신호전달에 영향을 미치며, 전사 프로그램과 단백질 항상성(proteostasis)을 형성하는 MAPK 및 NF-κB 같은 경로와도 교차한다. COP9 시그날로좀 기능의 교란은 사이클린과 전사인자 등 핵심 조절자들의 안정성 변화와 연관되어, 증식 조절 이상 및 유전체 유지의 장애에 기여하는 것으로 보고되었다. 따라서 GPS1/CSN1은 암 생물학의 기전 연구, 염증 관련 신호전달, 그리고 유비퀴틴–프로테아좀 경로의 조절에 대한 폭넓은 연구에서 관심의 대상이다.

CSN1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GPS1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GPS1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GPS1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GPS1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.