CROP Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426686-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CROPO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CROP (m) e o Plasmídeo Double Nickase CROP (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Luc7l3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CROP Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426686-NIC | 20 µg | $410.00 |
Luc7l3 codifica a proteína CROP do camundongo, um fator de ligação a RNA implicado no splicing de pré-mRNA e na regulação da maturação de transcritos associada ao spliceossomo. Ao influenciar decisões de splicing alternativo e o processamento de mRNA, Luc7l3 pode afetar programas de expressão gênica a jusante envolvidos em transições de estado celular, sinalização imune e diferenciação. A perturbação de reguladores de splicing está amplamente ligada à instabilidade do transcriptoma e à alteração do output do proteoma, processos frequentemente estudados no contexto de inflamação, hematopoiese e desregulação relacionada ao câncer. Assim, Luc7l3 serve como um nó útil para investigar como o controle spliceossomal molda a atividade de vias e o fenótipo em células de mamíferos.
CROP O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Luc7l3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Luc7l3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Luc7l3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Luc7l3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.