CRABP-I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419790

개요

Crabp1은 세포성 레티노산 결합 단백질 1(CRABP-I)을 암호화하며, CRABP-I는 세포질과 핵 내에서 올-트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid, RA)의 가용성을 조절하기 위해 RA를 완충하고 운반하는 고친화성 세포내 캐리어입니다. RA의 분배와 대사를 조절함으로써 CRABP-I는 세포 운명 결정, 분화, 조직 패터닝을 조절하는 RA 의존적 전사 프로그램에 영향을 미칩니다. 마우스 시스템에서 Crabp1은 RA 분해 대사와의 상호작용 및 비타민 A 유래 신호에 대한 세포 반응성 등을 포함해, 정형적인 RAR/RXR 활성화와는 구별되는 맥락 특이적 레티노이드 신호전달 역학을 규명하는 데 활용됩니다. 레티노이드 처리(handling)의 변화는 발생학적 표현형과 분화 및 항상성의 질병 연관성 조절 이상 전반과 폭넓게 관련되므로, Crabp1은 경로 수준의 교란(perturbation) 연구에서 유용한 표적 노드가 됩니다.

CRABP-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Crabp1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Crabp1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Crabp1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CRABP-I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CRABP-I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Crabp1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CRABP-I 기능에 중요한 Crabp1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Crabp1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CRABP-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CRABP-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Crabp1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CRABP-I HDR 플라스미드 (m) 및 CRABP-I HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Crabp1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Crabp1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.