connexin 37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407258
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- connexin 37 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico connexin 37, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
connexin 37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407258 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GJA4 codifica a conexina 37 (Cx37), uma proteína de canal de junções comunicantes (gap junctions) que se monta em conexons para mediar a troca intercelular direta de íons e pequenos metabólitos. O acoplamento dependente de Cx37 contribui para a homeostase vascular ao coordenar a sinalização entre células endoteliais e de músculo liso, envolvida em respostas ao estresse de cisalhamento, controle da proliferação e sinalização inflamatória. Alterações na expressão de GJA4 ou na função do canal têm sido associadas à disfunção vascular e a características cardiometabólicas, sendo frequentemente estudadas em contextos como aterosclerose e mecanismos relacionados à trombose. Como componente da comunicação por junções comunicantes, a conexina 37 se integra a vias mais amplas que regulam a função de barreira dos tecidos, a regulação do ciclo celular e o comportamento multicelular coordenado.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO connexin 37 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GJA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GJA4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GJA4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína connexin 37.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GJA4 para a investigação da sinalização de connexin 37, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GJA4 críticos para a função connexin 37
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GJA4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo connexin 37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo connexin 37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GJA4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo connexin 37 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR connexin 37 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GJA4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GJA4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.