COL1A2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400598

개요

COL1A2는 I형 콜라겐의 pro-α2 사슬을 암호화하며, 이는 이종 삼량체(heterotrimer)로 조립되는 대표적인 섬유성 콜라겐으로서 결합조직에 인장 강도를 부여합니다. 분비 및 세포외 가공 과정을 거친 뒤 I형 콜라겐은 세포외기질(ECM)에 편입되며, 인테그린(integrin) 및 디스코이딘 도메인 수용체(DDR) 의존적 신호전달을 통해 조직 구조와 기계적 신호전달(mechanotransduction)을 조절합니다. COL1A2의 발현과 콜라겐 섬유형성(fibrillogenesis)은 TGF-β 신호전달, 기질 금속단백분해효소(MMP) 활성, 섬유아세포 활성화 프로그램 등 ECM 리모델링 경로와 맞물려 있습니다. COL1A2가 비정상적으로 조절되면 기질 경직도 변화와 비정상적 콜라겐 침착을 유발할 수 있으며, 유전성 결합조직 질환과 섬유화성 리모델링 환경에서의 병태생리와 연관됩니다.

COL1A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 COL1A2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 COL1A2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 COL1A2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 COL1A2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 COL1A2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 COL1A2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• COL1A2 기능에 중요한 COL1A2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 COL1A2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• COL1A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 COL1A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 COL1A2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  COL1A2 HDR 플라스미드 (h) 및 COL1A2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 COL1A2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 COL1A2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.