COL1A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400064-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL1A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL1A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL1A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL1A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL1A1 Anticorpo (H-7): sc-518272
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL1A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400064-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL1A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400064-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL1A1 codifica a cadeia pro-α1 do colágeno tipo I, um importante componente estrutural da matriz extracelular que se organiza em colágeno fibrilar e confere resistência à tração aos tecidos conjuntivos. A sua biossíntese e maturação envolvem processamento no retículo endoplasmático (RE), hidroxilação de prolina/lisina, formação da tripla hélice, secreção e fibrilogênese extracelular, ligando o COL1A1 a vias de organização da MEC, adesão célula–matriz e remodelação tecidual. A expressão de COL1A1 está intimamente associada a programas de ativação de fibroblastos e a sinais como TGF-β, que coordenam a deposição de matriz e o reparo de feridas. Alterações genéticas ou regulatórias em COL1A1 estão associadas a fenótipos do tecido conjuntivo e do esqueleto e são amplamente estudadas no contexto de fibrose e remodelação do microambiente tumoral.
COL1A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL1A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL1A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL1A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL1A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.