COG5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411474

概要

COG5は、ゴルジ体内での逆行性小胞輸送を調整する保存性の高いオリゴマー型ゴルジ（COG）テザリング複合体の中核サブユニットをコードしています。小胞のドッキングおよびSNARE依存的な膜融合を支えることで、COG5はゴルジ体の構造、酵素の局在、ならびに分泌カーゴの効率的なプロセシングの維持に寄与します。COG複合体の機能が障害されると、糖鎖付加（グリコシル化）の恒常性が乱れ、細胞表面や細胞外マトリックスの組成が変化し得ます。その結果、タンパク質のソーティング、分泌、膜構造の編成に関連する経路に影響が及ぶ可能性があります。COG5および関連するCOG構成要素の変異は、先天性糖鎖付加異常症（CDG）や、ゴルジ輸送の不全に起因するより広範な表現型と関連付けられています。

COG5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOG5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COG5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COG5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、COG5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、COG5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COG5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• COG5の機能に不可欠なCOG5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COG5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• COG5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCOG5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COG5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  COG5 HDRプラスミド（h）および COG5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOG5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOG5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。