COG4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416653

Visão geral

O COG4 codifica uma subunidade central do complexo de ancoragem COG (conserved oligomeric Golgi), que mantém a arquitetura do aparelho de Golgi e coordena o tráfego vesicular retrógrado dentro das cisternas de Golgi. Ao regular o acoplamento de vesículas e a fusão dependente de SNAREs, o COG4 sustenta a reciclagem de enzimas de glicosilação e o processamento adequado de proteínas secretadas e de membrana em todo o sistema de endomembranas. A disfunção do complexo COG perturba o transporte do Golgi para o RE (retículo endoplasmático) e o transporte intra-Golgi, levando a alterações na glicosilação de proteínas e a efeitos amplos sobre a secreção, a maturação de receptores e a composição da membrana. Variantes em COG4 e em outros componentes do COG estão associadas a distúrbios congênitos da glicosilação e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando este gene relevante para o estudo de mecanismos de doença ligados ao tráfego no Golgi.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COG4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COG4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COG4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COG4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COG4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COG4 para a investigação da sinalização de COG4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COG4 críticos para a função COG4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COG4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo COG4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COG4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COG4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo COG4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COG4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COG4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COG4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.