Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CNPase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402463
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNPase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CNPase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CNPase Anticorpo (H-2): sc-166558
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNPase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402463 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CNP codifica a 2’,3’-nucleótido cíclico 3’-fosfodiesterase (CNPase), uma enzima associada à mielina, enriquecida em oligodendrócitos, que hidrolisa nucleótidos cíclicos 2’,3’ e contribui para a formação e manutenção da bainha de mielina. A CNPase localiza-se na mielina não compacta e em microdomínios do citoesqueleto/membrana, onde se relaciona com o metabolismo de RNA, o crescimento de prolongamentos e a regulação da morfologia oligodendroglial. Por meio dessas funções, a CNPase sustenta as interações axónio–glia e a estabilidade da mielina, cruzando-se com vias que governam a diferenciação glial e as respostas neuroinflamatórias. Alterações na expressão de CNP ou na atividade da CNPase têm sido associadas a contextos desmielinizantes e neurodegenerativos, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos da biologia da substância branca.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CNPase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CNP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CNP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CNP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CNPase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CNP para a investigação da sinalização de CNPase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CNP críticos para a função CNPase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CNP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CNPase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CNPase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CNP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CNPase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CNPase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CNP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CNP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.