CLK4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419690

개요

Clk4는 CDC 유사 키나아제 4(CLK4)를 암호화하며, CLK4는 세린/아르지닌-풍부(SR) 스플라이싱 인자를 인산화하는 이중 특이성 키나아제로서 전(前)-mRNA 스플라이싱이 전사 프로그램과 조율되도록 돕습니다. CLK4는 SR 단백질의 활성을 조절함으로써 세포 주기 진행, 분화, 스트레스 반응성 유전자 발현에 영향을 미치는 대체 스플라이싱 선택에 기여합니다. CLK 계열 신호는 프로테옴 다양성을 형성하는 RNA 처리 네트워크와 교차하며, 스플라이싱 조절의 이상은 실험 모델에서 종양성 전환 및 신경발달 관련 표현형과 흔히 연관됩니다. 마우스 시스템에서는 Clk4를 교란하는 것이 스플라이소좀 연관 인산화 역학이 조직 특이적 전사체 아이소폼과 하위 경로 출력에 어떤 영향을 미치는지 규명하는 데 유용한 접근법을 제공합니다.

CLK4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Clk4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Clk4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Clk4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLK4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLK4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Clk4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLK4 기능에 중요한 Clk4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Clk4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLK4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CLK4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Clk4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLK4 HDR 플라스미드 (m) 및 CLK4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Clk4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Clk4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.