claudin-18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404431

概要

CLDN18はクローディン18（claudin-18）をコードする遺伝子であり、胃や肺の上皮など組織特異的な環境において、傍細胞経路（paracellular）バリア機能や上皮極性に寄与する4回膜貫通型のタイトジャンクションタンパク質です。クローディン18は、他のクローディンやZOファミリーなどの足場タンパク質とともにタイトジャンクションストランドを組織化することで、接着部位の完全性、イオン選択性、ならびに細胞骨格ダイナミクスと連動したシグナル伝達の制御に関与します。CLDN18の発現量やジャンクションへの局在が変化すると、上皮のリモデリングやバリア恒常性の破綻と関連し、これらの過程はしばしば炎症や腫瘍生物学と結び付けて議論されます。さらにCLDN18は、細胞接着や分化状態に影響を及ぼす融合（fusion）イベントや系譜（lineage）プログラムの文脈でも研究されています。

claudin-18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCLDN18遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CLDN18内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CLDN18のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、claudin-18タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、claudin-18シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CLDN18欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• claudin-18の機能に不可欠なCLDN18エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CLDN18ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• claudin-18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびclaudin-18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CLDN18遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  claudin-18 HDRプラスミド（h）および claudin-18 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCLDN18ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCLDN18標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。