Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CKR-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407896
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CKR-10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CKR-10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CKR-10 Anticorpo (E-2): sc-365957
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CKR-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407896 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCR10 codifica o receptor de quimiocinas CKR-10, um GPCR de sete domínios transmembrana que se liga aos ligantes CCL27 e CCL28 para orientar a quimiotaxia de leucócitos e o homing específico para determinados tecidos. A sinalização de CKR-10 envolve proteínas G heterotriméricas para regular o fluxo de cálcio, vias dependentes de MAPK e PI3K, ativação de integrinas e remodelamento do citoesqueleto, que em conjunto determinam a migração celular e o posicionamento nas barreiras epiteliais. Esse receptor está implicado na vigilância imunológica e em programas de tráfego inflamatório na pele e em tecidos mucosos, onde alterações na atividade de CCR10 podem modificar a composição local de células imunes. Redes de quimiocinas associadas a CCR10 desreguladas têm sido estudadas no contexto de inflamação crônica e da biologia do microambiente tumoral, reforçando sua relevância como um nó mecanístico para pesquisas focadas em migração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CKR-10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCR10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCR10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCR10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CKR-10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCR10 para a investigação da sinalização de CKR-10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCR10 críticos para a função CKR-10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCR10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CKR-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CKR-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCR10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CKR-10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CKR-10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCR10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCR10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.