CIP4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406095

개요

TRIP10은 막 곡률 감지와 액틴 세포골격 재구성을 연결하는 F-BAR/SH3 도메인 어댑터 단백질인 Cdc42-상호작용 단백질 4(CIP4)를 암호화합니다. CIP4는 Cdc42, 다이너민, N-WASP와 협력하여 클라트린 매개 엔도사이토시스, 소포 수송, 피질 액틴 조립을 조율하며, 그 결과 수용체 내부화와 신호 약화를 조절합니다. 이러한 기능을 통해 CIP4는 세포 극성, 이동, 인바도포디아 유사 돌기 형성의 동역학 같은 과정에 기여하고, 세포골격 조직화 및 막 재형성을 조절하는 경로들과 연결됩니다. TRIP10/CIP4 활성이 비정상적으로 조절될 경우, 암 생물학과 같이 엔도사이토시스 및 액틴 네트워크의 변화가 관여하는 기타 질환에서 나타나는 비정상적 세포 운동성과 신호 프로그램의 맥락에서 연구되어 왔습니다.

CIP4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRIP10 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRIP10 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRIP10의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CIP4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CIP4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRIP10 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CIP4 기능에 중요한 TRIP10 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRIP10 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CIP4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CIP4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRIP10 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CIP4 HDR 플라스미드 (h) 및 CIP4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRIP10 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRIP10 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.