Chx10 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401103

개요

VSX2(Chx10)는 안구 영역(eye field)의 지정과 망막 전구세포 증식에 핵심적인 역할을 하는 호메오박스 전사인자로, 척추동물 망막 발생 과정에서 신경발생과 세포 운명 결정이 조율되도록 돕습니다. 또한 망막 양극성 뉴런의 발달과 신경망막 정체성 유지에 관여하는 전사 프로그램을 조절하며, WNT/β-카테닌, SHH, Notch 관련 유전자 조절 등 발달 신호 네트워크와 상호작용합니다. VSX2 기능의 변화는 소안구증(microphthalmia) 및 무안구증(anophthalmia)과 같은 선천성 안구 기형과 연관되어 왔고, 발현 조절 이상은 망막 이영양증 기전 연구와 줄기세포 유래 망막 오가노이드 개발 연구에서도 중요하게 다뤄집니다. DNA 결합 조절자로서 Chx10은 안구 및 신경 모델에서 분화 경로, 계통(라인리지) 결정, 유전자 조절 네트워크에 미치는 영향을 평가하기 위해 흔히 연구됩니다.

Chx10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 VSX2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 VSX2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 VSX2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Chx10 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Chx10 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 VSX2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Chx10 기능에 중요한 VSX2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 VSX2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Chx10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Chx10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 VSX2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Chx10 HDR 플라스미드 (h) 및 Chx10 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 VSX2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 VSX2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.