Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CFTR Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400653-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- CFTR as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- CFTR As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo CFTR Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo CFTR Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor CFTR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: CFTR Anticorpo (A-3): sc-376683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CFTR Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-400653-LAC | 200 µl | $455.00 |
O CFTR humano (regulador de condutância transmembranar da fibrose cística) codifica um transportador do tipo “ATP-binding cassette” que funciona como um canal de cloreto e bicarbonato regulado por cAMP/PKA na membrana apical de células epiteliais. Ao controlar o fluxo de ânions, o CFTR coordena a secreção de fluidos epiteliais, a hidratação da superfície das vias aéreas e a composição iônica do muco, com efeitos a jusante sobre a depuração mucociliar e a homeostase da barreira. A atividade do CFTR integra-se a vias que regulam o transporte de íons e o tráfego de membranas, incluindo a abertura/fechamento do canal dependente de fosforilação e a endocitose/reciclagem reguladas. A desregulação da expressão ou da função do CFTR está fortemente associada a defeitos no transporte epitelial e é amplamente estudada no contexto da biologia da fibrose cística e de fenótipos relacionados em vias aéreas, intestino e pâncreas.
As Partículas de Ativação Lentivirais CFTR (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CFTR numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais CFTR (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CFTR, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CFTR. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CFTR e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.