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CEP55慢病毒激活颗粒(h) | sc-417522-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 CEP55(中心体蛋白 55)是一种受细胞周期调控的因子,在有丝分裂晚期累积于中心体和中体(midbody),并在该阶段协调胞质分裂的最终切断(abscission),确保子细胞成功分离。CEP55 参与中体的组装以及依赖 ESCRT 的膜断裂过程,将有丝分裂纺锤体动态与细胞分裂完成相连接。CEP55 表达失调常与异常增殖、染色体不稳定性以及细胞周期进程改变相关,因此在癌症及其他高增殖背景下,是研究有丝分裂调控的一个重要节点。此外,CEP55 依赖的变化还会影响信号网络,使中心体功能与基因组维持及细胞应激反应相耦联。
CEP55 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CEP55 表达。
CEP55 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CEP55转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CEP55表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CEP55 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。