CEP164 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403550

개요

CEP164(중심체 단백질 164)는 모(母) 중심립의 원위 부속지(distal appendage)를 구성하는 단백질로, 1차 섬모(primary cilium)의 형성과 섬모 소포(ciliary vesicle)가 기저체(basal body)에 도킹하는 과정에 필수적입니다. CEP164는 원위 부속지 조립을 위한 스캐폴드로 기능하며, 섬모 생성 인자의 모집을 돕고 중심체 성숙을 섬모형성 및 세포주기 조절과 연결합니다. 또한 중심체–섬모 축의 조절을 통해 1차 섬모가 매개하는 신호 경로(헤지호그 의존 과정 포함)에 영향을 미칩니다. CEP164의 발현 이상 또는 돌연변이는 섬모병증(ciliopathy)과 관련된 표현형과 연관되며, 특히 네프론프티시스(nephronophthisis) 관련 질환을 비롯해 섬모 기능 장애와 연결되는 더 광범위한 발생 이상과도 관련됩니다.

CEP164 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CEP164 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CEP164 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CEP164의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CEP164 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CEP164 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CEP164 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CEP164 기능에 중요한 CEP164 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CEP164 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CEP164 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CEP164 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CEP164 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CEP164 HDR 플라스미드 (h) 및 CEP164 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CEP164 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CEP164 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.