Centriolin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404195

개요

CNTRL은 중심체와 미드바디에 연관된 스캐폴드 단백질인 센트리올린(centriolin)을 암호화하며, 중심체 성숙, 유사분열 진행, 그리고 세포질분열의 완료에 필요합니다. 센트리올린은 어미 중심소체(mother centriole)와 미드바디에서 단백질 복합체의 모집과 조직화를 지원하여, 방추 기능과 절단(abscission)이 올바르게 일어나도록 하는 미세소관 기반 구조를 조율합니다. CNTRL 기능이 교란되면 중심체 항상성이 흐트러지고 세포질분열 실패 및 염색체 불안정성이 유발될 수 있는데, 이는 인간 세포 모델에서 이수성(aneuploidy)과 증식 스트레스(proliferative stress)를 연구하는 데 관련된 과정입니다. 따라서 CNTRL은 중심체 조절, 세포주기 체크포인트, 그리고 분열면 제어를 조사하기 위한 유용한 표적(노드)입니다.

Centriolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CNTRL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CNTRL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CNTRL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Centriolin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Centriolin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CNTRL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Centriolin 기능에 중요한 CNTRL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CNTRL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Centriolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Centriolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CNTRL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Centriolin HDR 플라스미드 (h) 및 Centriolin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CNTRL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CNTRL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.