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CENP-B双切口酶质粒(h) | sc-401356-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CENP-B双切口酶质粒(h2) | sc-401356-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **CENPB** 基因编码着丝粒蛋白B(CENP-B)。CENP-B 是一种序列特异性的 DNA 结合因子,能够识别 α-卫星重复序列中的 CENP-B box 基序,从而帮助组织着丝粒染色质。CENP-B 参与动粒组装,并在有丝分裂过程中促进染色体的正确分离;通过确保纺锤体正确附着及着丝粒功能正常来维持基因组稳定性。着丝粒完整性破坏以及动粒信号异常与非整倍体和染色体不稳定性相关,这些过程常在癌症生物学与发育障碍研究中被重点关注。CENP-B 也是抗着丝粒抗体阳性的自身免疫疾病中著名的自身抗原,因此与核抗原呈递及免疫识别机制研究密切相关。
CENP-B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CENPB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CENPB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CENPB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CENPB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。