CENP-B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401356

개요

CENPB는 동원체 단백질 B(CENP-B)를 암호화하며, α-위성 반복(α-satellite repeats) 내의 CENP-B box를 인식하는 서열 특이적 DNA 결합 인자로서 동원체 염색질(centromeric chromatin)의 조직화를 돕습니다. CENP-B는 유사분열 동안 동원체 구조와 고차원적 이질염색질(heterochromatin) 조직을 지지함으로써 키네토코어(kinetochore) 조립과 염색체 분리에 기여합니다. 동원체 유지와 세포주기 진행에서의 역할을 통해, CENPB 기능 변화 또는 동원체 조절 이상은 이수성(aneuploidy) 및 염색체 이상과 같은 유전체 불안정성 표현형과 관련되며, 이는 다양한 암에서 관찰됩니다. 또한 CENP-B는 항-동원체 항체(anti-centromere antibody) 반응에서 잘 확립된 자가항원으로, 동원체 생물학이 자가면역 관련 세포 표현형과 연결됨을 시사합니다.

CENP-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CENPB 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CENPB 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CENPB의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CENP-B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CENP-B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CENPB 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CENP-B 기능에 중요한 CENPB 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CENPB 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CENP-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CENP-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CENPB 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CENP-B HDR 플라스미드 (h) 및 CENP-B HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CENPB 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CENPB 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.