CENP-A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402359

개요

CENPA는 중심절에서 정형 히스톤 H3를 대체하는 히스톤 H3 변이체인 CENP-A를 암호화하며, 이를 통해 중심절 크로마틴을 형성하고 키네토코어의 정체성을 규정합니다. CENP-A의 침착(deposition)과 유지는 중심절 조립 경로 및 유사분열 세포주기 진행과 조율되어, 정확한 염색체 정렬과 분리를 뒷받침합니다. CENP-A의 발현 수준 또는 중심절 국소화에 이상이 생기면 키네토코어 기능이 불안정해지고, 염색체 불안정성과 이수성(aneuploidy)이 촉진되며, 이는 다양한 암 모델에서 관찰되는 유전체 유지 결함과 관련된 맥락에서 자주 연구됩니다.

CENP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CENPA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CENPA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CENPA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CENP-A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CENP-A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CENPA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CENP-A 기능에 중요한 CENPA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CENPA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CENP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CENP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CENPA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CENP-A HDR 플라스미드 (h) 및 CENP-A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CENPA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CENPA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.