CDKN2B/p15 INK4B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-400570-KO-2

개요

CDKN2B는 p15 INK4B를 암호화하는데, p15 INK4B는 CDK4/6에 결합하는 사이클린 의존성 키나아제 억제 단백질로서 사이클린 D 의존적 RB 인산화를 억제하고 G1/S 체크포인트를 유지합니다. CDKN2B의 발현은 TGF-β 신호전달과 같은 항증식성 신호에 의해 흔히 유도되며, 이를 통해 세포외 스트레스 및 분화 프로그램이 세포주기 정지와 세포 노화(senescence)와 연결됩니다. CDKN2B는 9p21 좌위에 위치해 있으며, 이 유전체 영역은 암에서 빈번하게 변형되고 다양한 노화 관련 및 심혈관·대사 형질에 대한 감수성과도 연관되어 있습니다. p15 INK4B가 매개하는 CDK4/6 조절의 이상은 비정상적 증식, 계통(lineage) 결정의 변화, 그리고 성장 억제 경로로부터의 회피에 기여합니다.

CDKN2B/p15 INK4B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 CDKN2B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CDKN2B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CDKN2B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CDKN2B/p15 INK4B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CDKN2B/p15 INK4B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CDKN2B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CDKN2B/p15 INK4B 기능에 중요한 CDKN2B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CDKN2B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CDKN2B/p15 INK4B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CDKN2B/p15 INK4B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CDKN2B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CDKN2B/p15 INK4B HDR 플라스미드 (h) 및 CDKN2B/p15 INK4B HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CDKN2B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CDKN2B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.