Cdk6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400309

개요

CDK6는 사이클린 의존성 키나아제 6(Cdk6)을 암호화하며, Cdk6은 D형 사이클린과 짝을 이루어 RB 계열 단백질을 인산화하고 G1기에서 S기로의 세포주기 진행을 촉진하는 세린/트레오닌 키나아제입니다. Cdk6 활성은 사이클린 D–CDK4/6–RB–E2F 축을 통해 유사분열 촉진 신호(미토제닉 신호)와 체크포인트 조절을 통합하고, 증식·분화·노화(senescence)를 조절하는 경로들과도 상호작용합니다. CDK6 발현 또는 신호전달의 이상 조절은 암에서 비정상적인 세포주기 제어와 흔히 연관되며, 조혈계 계통 결정과 염증성 전사 프로그램에도 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 세포주기 진입을 조율하는 중심적 역할 때문에, CDK6는 종양 생물학, 줄기/전구세포 조절, 그리고 경로 수준에서의 치료 저항성 기전 연구에서 널리 연구됩니다.

Cdk6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CDK6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CDK6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CDK6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cdk6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cdk6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CDK6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cdk6 기능에 중요한 CDK6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CDK6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cdk6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Cdk6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CDK6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cdk6 HDR 플라스미드 (h) 및 Cdk6 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CDK6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CDK6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.