Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK5RAP1 (h): sc-407278
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CDK5RAP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CDK5RAP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CDK5RAP1 Antibody (D-1): sc-398764
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK5RAP1 (h) | sc-407278 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CDK5RAP1 (protéine 1 associée à la sous-unité régulatrice de CDK5) est une enzyme radicalaire dépendante de la S-adénosylméthionine, principalement localisée dans les mitochondries, où elle catalyse la modification post-transcriptionnelle des ARNt mitochondriaux, contribuant à la fidélité de la traduction mitochondriale et à l’intégrité de la chaîne respiratoire. En régulant la protéostasie mitochondriale et la capacité de phosphorylation oxydative, CDK5RAP1 influence le métabolisme énergétique cellulaire, l’équilibre rédox et les réponses d’adaptation au stress. Une activité altérée de CDK5RAP1 a été associée à des dysfonctionnements mitochondriaux et fait fréquemment l’objet d’études dans des contextes de reprogrammation métabolique, d’adaptation à l’hypoxie et de stabilité du génome sous stress oxydant. Ces voies font de CDK5RAP1 une cible pertinente pour des études mécanistiques en biologie du cancer et dans d’autres maladies caractérisées par une dysfonction mitochondriale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK5RAP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDK5RAP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDK5RAP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDK5RAP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CDK5RAP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDK5RAP1 pour l'étude de la signalisation de CDK5RAP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CDK5RAP1 essentiels à la fonction de CDK5RAP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDK5RAP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CDK5RAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CDK5RAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDK5RAP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CDK5RAP1 plasmide HDR (h) et le CDK5RAP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDK5RAP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDK5RAP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.