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Cdc6慢病毒激活颗粒(h) | sc-400796-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 CDC6 基因编码 Cdc6,这是一种核心的 AAA+ ATP 酶,是 DNA 复制起始点“许可”(origin licensing)以及复制前复合体(pre-replication complex)装配所必需的因子,在有丝分裂末期和 G1 期与 ORC 协同并促进 MCM 装载。为防止重复复制并维持基因组稳定性,Cdc6 的活性受到 CDK 依赖性磷酸化及泛素介导降解的严格调控。CDC6 表达失衡与复制压力、检查点激活以及染色体不稳定性相关,这些过程常在肿瘤发生与增殖性疾病研究中被重点关注。作为复制许可因子,Cdc6 常用于在人体模型系统中探究细胞周期调控、S 期进入以及 DNA 损伤应答信号通路。
Cdc6 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CDC6 表达。
Cdc6 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CDC6转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Cdc6表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CDC6 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。