Cdc37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401574

概要

CDC37は、幅広いタンパク質キナーゼを足場として結び付けて安定化し、その成熟、コンフォメーションの維持、シグナル伝達能を支える、保存性の高いHSP90の共シャペロンであるCdc37をコードします。HSP90とクライアントの相互作用を協調的に制御することで、Cdc37は細胞周期の進行、ストレス応答、ならびにMAPK、PI3K–AKTなどのキナーゼ駆動型経路にまたがるシグナル伝達といった主要プロセスに影響を与えます。CDC37の機能が攪乱されると、がん関連キナーゼや発生関連キナーゼのプロテオスタシスが変化し、リン酸化ネットワークや下流の転写プログラムが再編され得ます。キナーゼ恒常性の制御因子として、CDC37は、がん生物学やその他のキナーゼ関連疾患に関わる異常増殖、プロテオトキシックストレス、経路のリワイヤリングといった文脈で頻繁に研究されています。

Cdc37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDC37遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDC37内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDC37のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Cdc37タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Cdc37シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDC37欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Cdc37の機能に不可欠なCDC37エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDC37ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Cdc37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCdc37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDC37遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Cdc37 HDRプラスミド（h）および Cdc37 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDC37ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDC37標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。