Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD88 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419395-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD88O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD88 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CD88 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para C5ar1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD88 Anticorpo (R63): sc-53797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD88 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419395-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD88 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419395-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C5ar1 codifica o CD88, o receptor canônico acoplado à proteína G para a anafilatoxina do complemento C5a, conectando a ativação do complemento à quimiotaxia de leucócitos, desgranulação, burst oxidativo e produção de citocinas. A sinalização do CD88 aciona vias que incluem PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCβ–fluxo de Ca²⁺ e NF-κB, modulando a ativação da imunidade inata e o tráfego de células inflamatórias. Em modelos murinos, a atividade de C5ar1 é frequentemente investigada em contextos de infecção, inflamação estéril, autoimunidade, neuroinflamação e lesão tecidual, nos quais respostas dirigidas pelo complemento influenciam fenótipos associados à doença. Como o CD88 é expresso em diversas populações mieloides e em algumas células não hematopoéticas, ele constitui um nó central para dissecar o crosstalk entre complemento e sistema imune em microambientes complexos.
CD88 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus C5ar1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de C5ar1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função C5ar1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com C5ar1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.