CD88 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-419395-NIC

C5ar1는 보체 아나필라톡신 C5a의 대표적 G 단백질 연결 수용체인 CD88을 암호화하며, 보체 활성화를 백혈구의 화학주성, 탈과립, 산화적 폭발, 사이토카인 생성과 연결한다. CD88 신호전달은 PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCβ–Ca²⁺ 유입, NF-κB 등을 포함한 경로를 동원해 선천면역 활성화와 염증세포의 이동(유주)을 조절한다. 마우스 모델에서 C5ar1 활성은 감염, 무균성 염증, 자가면역, 신경염증, 조직 손상 등 보체 유도 반응이 질환 관련 표현형에 영향을 미치는 다양한 맥락에서 자주 연구된다. CD88은 골수계 세포 집단 전반과 일부 비조혈계 세포에도 발현되므로, 복잡한 미세환경에서 보체–면역 상호작용을 규명하는 핵심 결절점으로 활용된다.

CD88 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 C5ar1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 C5ar1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 C5ar1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, C5ar1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.